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天津市蘭力科化學電子高技術有限公司
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電化學發光反應的步驟
點擊次數:1038 更新時間:2023-05-24
電化學發光反應:電化學發光(electro-chemiluminescence,ECL)是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,實際上包括了電化學和化學發光兩個過程?;瘜W發光劑三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2和電子供體三丙胺(TPA)在陽電極表面同時各失去一個電子發生氧化反應。二價的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三價,后者是一種強氧化劑。TPA被氧化成陽離子自由基TPA+*,后者很不穩定,自發地失去一個質子(H+),形成自由基TPA*,這是一種非常強的還原劑。這兩個高反應基團在電極表面迅速反應,三價的[Ru(bpy)3]3+被還原形成激發態的二價[Ru(bpy)3]2+*,能量來源于[Ru(bpy)3]3+和TPA*之間存在的高電化學電位差。TPA*自身被氧化成二丙胺和丙醛。接著激發態的   [Ru(bpy)3]2+*衰減成基態的[Ru(bpy)3]2+,同時發射一個波長620nm的光子。這一過程在電極表面周而復始地進行,產生許多光子,使光信號得以增強。
電化學發光反應的步驟:
(1)將試管內兩步反應結束的反應液輸入流動池,由于磁鐵吸引,磁性微粒被吸著在電極上,其余反應物流出流動池,完成游離的和結合的標記抗體的分離。
(2)將TPA溶液送入流動池,將殘余的游離標記抗體排出流動池,在流動池中充滿TPA溶液。
(3)撤下磁鐵,電極上通電,三聯吡啶釕與TPA發生電化學發光反應,發出的光被光電倍增管收集,測定光強度。
(4)通過換算得出待測標本中的抗原濃度。
(5)在流動池中送入清洗液,將反應物沖洗,即可測定下一個標本。
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